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    先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞**繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物**中使动物怀孕,便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。**技术不需要雌雄**,不需要**和卵子的结合,只需从动物身上提取一个单细胞,用人工的方法将其培养成胚胎,再将胚胎植入雌性动物体内,就可孕育出新的个体。这种以单细胞培养出来的**动物,具有与单细胞供体完全相同的特征,是单细胞供体的“复制品”。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“**羊”多利和“**猴”。**技术的成功,被人们称为“历史性的**,科学的创举”。有人甚至认为,**技术可以同当年原**的问世相提并论。**技术可以用来生产“**人”,可以用来“复制”人,因而引起了全世界的广泛关注。对人类来说,**技术是悲是喜,是祸是福?唯物辩证法认为,世界上的任何事物都是矛盾的统一体,都是一分为二的。**技术也是这样。如果**技术被用于“复制”像**之类的战争狂人,那会给人类社会带来什么呢?即使是用于“复制”普通的人,也会带来一系列的**道德问题。如果把**技术应用于畜牧业生产,将会使优良牲畜品种的培育与繁殖发生根本性的变革。若将**技术用于基因治疗的研究,就极有可能攻克那些危及人类生命健康的**、**病等顽疾。**技术犹如原子能技术,是一把双刃剑,剑柄掌握在人类手中。人类应该采取联合行动,避免“**人”的出现,使**技术造福于人类社会。两次的飞跃 非哺乳类到哺乳类
    胚胎细胞**到体细胞** **的历史年代 1952 1972 1978 1996 1998 2000 2001 成果 **蝌蚪 基因复制 ** **羊 大批** **猴 **牛和猫 **技术又称为“生物放大技术”,它经历了三个发展时期:第一个时期是微生物**时期,即用一个细菌可以很快复制出成千上万个和它一模一样的细菌,从而变成一个细菌群;第二个时期是生物技术**时期,比如用遗传基因一dna进行**;第三个时期是动物**时期,即由一个细胞**成一个动物。**绵羊“多利”就是由一头母羊的体细胞**而来,使用的便是动物**技术。在自然界,有不少植物生来就具有**本能,如番薯、马铃薯、玫瑰等能够进行插枝繁殖的植物。而动物的**技术,则经历了由胚胎细胞到体细胞的发展过程。一些无脊椎动物(虫类、某些鱼类、蜥蜴和青蛙)未受精的卵也可以在某些特定环境下,比如受到化学刺激的条件下,成长并发育成完整个体。这一过程也被称为是产卵雌性的**。早在20世纪50年代,美国的科学家以两栖动物和鱼类作为研究对象,首创了细胞核移植技术,这可以比做“狸猫换太子”。其基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等手段使两者融合为一体,然后促使这一新细胞**繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后(罗斯林研究所**羊用了约为6天的时间),再被植入动物**中使动物怀孕便可产下与提供细胞者基因相同的动物。在这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。培育成功三代**鼠的“火奴鲁鲁技术”与**多利羊技术的主要区别在于,**过程中的遗传物质不经过培养液的培养,而是直接用物理方法注入卵细胞里面。这一过程中采用化学刺激法代替电刺激法来促使卵细胞的融合。1986年,英国科学家魏拉德森用胚胎细胞**出一只羊,以后又有人相继**出牛、鼠、兔、猴等动物。这些**动物的诞生,均是利用胚胎细胞作为供体细胞进行细胞核移植从而获得成功的。这种**技术的难度要小一些,比较适合研究。而**绵羊“多利”是用乳腺上皮细胞(体细胞)作为供体细胞进行细胞核移植的,它翻开了生物**史上崭新的一页,突破了利用胚胎细胞进行核移植的传统方式,使**技术有了长足的进展。多利完全继承了其亲生母亲一体细胞提供者一多塞特母绵羊的核dna(仍有细胞质遗传),是多塞特母绵羊的“复制品”。同一**的所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的**,例如:同卵双胞胎实际上就是一种**。然而,天然的哺乳动物**的发生率极低,成员数目太少(一般为两个),且缺乏目的性,所以很少能够被用来为人类造福,因此,人们开始探索用人工的方法来生产高等动物**。这样,**一词就开始被用作动词,指人工培育**动物这一动作。目前,生产哺乳动物**的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。**羊“多利”,以及其后各国科学家培育的各种**动物,采用的都是细胞核移植技术。所谓细胞核移植,是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核,经显微手术和细胞融合方法移植到去核卵母细胞中,重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。与胚胎分割技术不同,细胞核移植技术,特别是细胞核连续移植技术可以产生无限个遗传相同的个体。由于细胞核移植是产生**动物的有效方法,故人们往往把它称为动物**技术。采用细胞核移植技术**动物的设想,最初由汉斯·施佩曼在1938年提出,他称之为“奇异的实验”,即从发育到后期的胚胎(成熟或未成熟的胚胎均可)中取出细胞核,将其移植到一个卵子中。这一设想是现在**动物的基本途径。从1952年起,科学家们首先采用青蛙开展细胞核移植**实验,先后获得了蝌蚪和成体蛙。1963年,**童第周教授领导的科研组,首先以金鱼等为材料,研究了鱼类胚胎细胞核移植技术,获得成功。1964年,英国科学家格登(j.gurdon)将非洲爪蟾未受精的卵用紫外线照射,破坏其细胞核,然后从蝌蚪的体细胞—个上皮细胞中吸取细胞核,并将该核注入核被破坏的卵中,结果发现有1.5%这种移核卵分化发育成为正常的成蛙。格登的试验第一次证明了动物的体细胞核具有全面性。哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果在1981年取得—卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。1984年,施特恩·维拉德森用取自羊的未成熟胚胎细胞**出一只活产羊,其他人后来利用牛、猪、山羊、兔和猕猴等各种动物对他采用的实验方法进行了重复实验。1989年,维拉德森获得连续移核二代的**牛。1994年,尼尔·菲尔斯特用发育到至少有120个细胞的晚期胚胎**牛。到1995年,在主要的哺乳动物中,胚胎细胞核移植都获得成功,包括冷冻和体外生产的胚胎;对胚胎干细胞或成体干细胞的核移植实验,也都做了尝试。但到1995年为止,成体动物已分化细胞核移植一直未能取得成功。**羊“多利”的意义和引起的反响
    以上事实说明,在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞**羊“多利”培育成功之前,胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上,“多利”的**在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程,但这并不能减低“多利”的重大意义,因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物,是**技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着:在理论上证明了,同植物细胞一样,分化了的动物细胞核也具有全能性,在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化;在实践上证明了,利用体细胞进行动物**的技术是可行的,将有无数相同的细胞可用来作为供体进行核移植,并且在与卵细胞相融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作,从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物提供了有效方法。在理论上,利用同样方法,人可以复制“**人”,这意味着以往科幻小说中的**狂人**自己的想法是完全可以实现的。因此,“多莉”的诞生在世界各国科学界、政界乃至宗教界都引起了强烈反响,并引发了一场由**人所衍生的道德问题的讨论。各国**有关人士、民间纷纷作出反应:**人类有悖于**道德。尽管如此,**技术的巨大理论意义和实用价值促使科学家们加快了研究的步伐,从而使动物**技术的研究与开发进入一个高潮。**羊“多莉”的诞生在全世界掀起了**研究热潮,随后,有关**动物的报道接连不断。1997年3月,即公布“多莉”培育成功后近1个月的时间里,美国、****和澳大利亚科学家分别发表了他们成功**猴子、猪和牛的消息。不过,他们都是采用胚胎细胞进行**,其意义不能与“多莉”相比。同年7月,罗斯林研究所和ppl公司宣布用基因改造过的胎儿成纤维细胞**出世界上第一头带有人类基因的转基因绵羊“波莉”(polly)。这一成果显示了**技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值。1998年7月,美国夏威夷大学wakayama等报道,由小鼠卵丘细胞**了27只成活小鼠,其中7只是由**小鼠再次**的后代,这是继“多利”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。此外,wakayama等人采用了与“多利”不同的、新的、相 对简单的且成功率较高的**技术,这一技术以该大学所在地而命名为“檀香山技术”。此后,美国、法国、荷兰和韩国等国科学家也相继报道了体细胞**牛成功的消息;日本科学家的研究热情尤为惊人,1998年7月至1999年4月,东京农业大学、近畿大学、家畜改良事业团、地方(石川县、大分县和鹿儿岛县等)家畜试验场以及民间企业(如日本最大的奶商品公司雪印乳业等)纷纷报道了,他们采用牛耳部、臀部肌肉、卵丘细胞以及初乳中提取的乳腺细胞**牛的成果。至1999年底,全世界已有6种类型细胞—胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管/**上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞**后代成功诞生。2000年6月,**西北农林科技大学利用成年山羊体细胞**出两只“**羊”,但其中一只因呼吸系统发育不良而早夭。据介绍,所采用的**技术为该研究组自己研究所得,与**“多利”的技术完全不同,这表明**科学家也掌握了体细胞**的尖端技术。2012年3月18日凌晨,**农业科学院北京畜牧兽**研究所胚胎工程与繁殖技术室在昌平试验牛场通过剖腹产,获得体细胞**公牛1头,母牛妊娠期279天,牛犊出生重58.2千克,目前生理指标一切正常。经北京华大方瑞鉴定中心鉴定,该**后代与细胞来源的供体公牛dna一致。这是我国首次采用无透明带**方法获得的荷斯坦种公牛体细胞**后代,也是第三例荷斯坦种公牛体细胞**公牛。在不同种间进行细胞核移植实验也取得了一些可喜成果,1998年1月,美国威斯康星一麦迪逊大学的科学家们以牛的卵子为受体,成功**出猪、牛、羊、鼠和猕猴五种哺乳动物的胚胎,这一研究结果表明,某个物种的未受精卵可以同取自多种动物的成熟细胞核相结合。虽然这些胚胎都流产了,但它对异种**的可能性作了有益的尝试。1999年,美国科学家用牛卵子**出珍稀动物盘羊的胚胎;**科学家也用兔卵子**了大熊猫的早期胚胎,这些成果说明**技术有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径。奇妙的**技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面:
    (1)培育优良畜种和生产实验动物;(2)生产转基因动物;(3)生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法;(4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。转基因动物研究是动物生物工程领域中最诱人和最有发展前景的课题之一,转基因动物可作为**用**的供体、作为生物反应器,以及用于家畜遗传改良、创建疾病实验模型等。但目前转基因动物的实际应用并不多,除单一基因修饰的转基因小鼠**学模型较早得到应用外,转基因动物乳腺生物反应器生产**物蛋白的研究时间较长,已进行了10多年,但目前在全世界范围内仅有2例**品进入3期临床试验,5~6个**品进入2期临床试验;而其农艺性状发生改良、可资畜牧生产应用的转基因家畜品系至今没有诞生。转基因动物制作效率低、定点整合困难所导致的成本过高和调控失灵,以及转基因动物有 性繁殖后代遗传性状出现分离、难以保持始祖的优良胜状,是制约当今转基因动物实用化进程的主要原因。体细胞**的成功为转基因动物生产掀起一场新的**,动物体细胞**技术为迅速放大转基因动物所产生的种质创新效果提供了技术可能。采用简便的体细胞转染技术实施目标基因的转移,可以避免家畜生殖细胞来源困难和低效率。同时,采用转基因体细胞系,可以在实验室条件下进行转基因整合预检和性别预选。在核移植前,先把目的外源基因和标记基因(如lagz基因和新霉素抗生基因)的融合基因导入培养的体细胞中,再通过标记基因的表现来筛选转基因阳性...

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